| 稀有鮈鲫HMGR基因全长克隆及雄鱼经五氯酚暴露基因表达的分析 |
| 摘要点击 1720 全文点击 1041 投稿时间：2013-12-11 修订日期：2014-03-12 |
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| 中文关键词 稀有鮈鲫 基因克隆 HMGR 五氯酚 表达分析 |
| 英文关键词 Gobiocypris rarus gene clone 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMGR) pentachlorophenol (PCP) expression analysis |
| 作者 | 单位 | E-mail | | 邓川 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | dengchuan7@126.com | | 毛思予 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 熊力 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 张晓峥 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 李伟 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 高香 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 刘秋萍 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 陈韵 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | | | 刘堰 | 西南大学生命科学学院, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 三峡库区生态环境教育部重点实验室, 水产科学重庆市市级重点实验室, 重庆 400715 | liuyan@swu.edu.cn |
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| 中文摘要 |
| 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase，HMGR）是甲羟戊酸（mevalonic acid，MVA）途径中的第一个关键限速酶. 克隆稀有鮈鲫HMGR基因全长，分析该基因在不同组织及雄鱼经不同浓度五氯酚（pentachlorophenol，PCP）暴露的表达差异，探索PCP对类固醇激素前体（胆固醇）合成水平基因转录调控的内分泌干扰机制. 采用同源克隆策略及cDNA末端快速扩增技术（rapid-amplification of cDNA ends，RACE），从稀有鮈鲫肝脏中首次克隆得到3101碱基（bp）的HMGR基因cDNA全长，基因命名为GrHMGR（GenBank accession No： KF885724）. GrHMGR编码884个氨基酸，系统发育树分析表明，GrHMGR编码的蛋白与其他鱼类来源的HMGR氨基酸序列同源性较高. Real-time PCR分析表明GrHMGR的表达有组织特异性，在大脑，性腺和肝脏中均有表达，性腺中表达量最高. 稀有鮈鲫雄鱼经不同浓度PCP暴露后，GrHMGR在大脑和性腺的表达随PCP浓度的增加显著下降，然而在肝脏组织中表达趋势有所不同. HMGR的表达下降会减少胆固醇的合成. 说明PCP暴露会通过干扰稀有鮈鲫的胆固醇合成途径，进而对内分泌系统产生影响. |
| 英文摘要 |
| 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMGR) is the first rate-limiting enzyme in the mevalonate (MVA) pathway. The full-length cDNA of HMGR was cloned from Gobiocypris rarus, and HMGR expression profiles in different tissues and in response to different treatments of pentachlorophenol (PCP) were analyzed by real-time PCR, to investigate the endocrine disruption mechanism of PCP, which altered steroid hormone precursors (cholesterol) levels by modulating gene transcription profiles of HMGR. Based on the homologous clone strategy and rapid-amplification of cDNA ends (RACE) technology, the full-length 3101-base-pair (bp) cDNA of HMGR was isolated from the livers of rare minnow (Gobiocypris rarus) for the first time, and was designated as GrHMGR (GenBank accession number KF885724). GrHMGR encoded a protein of 884 amino acids and phylogenetic tree analysis indicated that the deduced protein GrHMGR had extensive sequence similarities to other fish HMGRs. Real-time PCR analyses indicated that GrHMGR mRNA expression was tightly controlled in a tissue-specific fashion, with the sites of expression being brain, gonads and liver, and the highest site of expression being gonads. After male rare minnows were exposed to different concentrations of PCP, significant decrease in GrHMGR gene expression with increased PCP concentration in the brain and gonads were observed, together with the differential gene expression trend in the liver. Furthermore, it was found that the decrease of HMGR could reduce the synthesis of cholesterol. This proved that PCP might disrupt the pathway of cholesterol synthesis and then influenced the endocrine system of rare minnow. |
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