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微囊藻毒素-LR完全抗原的设计及制备
摘要点击 1360  全文点击 1166  投稿时间:2004-09-06  修订日期:2004-10-15
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中文关键词  微囊藻毒素-LR  完全抗原  偶联比
英文关键词  Microcystin-LR  complete antigen  coupling ratio
作者单位
盛建武 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室 北京100084 
何苗 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室 北京100084 
宋保栋 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室 北京100084 
施汉昌 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室 北京100084 
钱易 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室 北京100084 
中文摘要
      从偶联位点、偶联剂、载体蛋白和偶联步骤等分析出发,设计了微囊藻毒素-LR (Microcystin-LR ,MC-LR)完全抗原的制备方法.在半抗原分子第7位氨基酸分子上引进1个自由的氨基;再用戊二醛2步法将此中间产物(H2N-etMC-LR)分别与BSA和OVA偶联.中间产物和偶联产物分别经固相萃取和透析纯化后,经SDS凝胶电泳、紫外扫描及生物质谱技术鉴定,结果表明MC-LR与BSA的平均偶联比能达到5以上,满足了进一步免疫的要求.
英文摘要
      Based on the analysis of coupling location, coupling regent, carrying protein and coupling process, completed antigen of Microcystin-LR (MC-LR) was synthesized. A free amidogen was introduced to microcystin-LR (MC-LR) using chemical modification (aminoethylation) of its 7th core amino acids, N-methyl-dehydroalanine. The intermediate product Aminoethyl-MC-LR (H2N-etMC-LR) was purified by Solid Phase Elute (SPE) and identified by Mass Spectrometry,then coupled with BSA through glutaraldehyde to be complete antigen. The completed antigen was dialyzed and identified by SDS-PAGE,UV-scanning and bio-mass spectrometry. The result show that the coupling ratio between MC-LR and BSA of complete antigen in average was over 5, and it is sufficient to immunity.

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