2. 江西省农业环境监测站, 南昌 330046;
3. 萍乡市农业局, 萍乡 337000
2. Agricultural Environmental Monitoring Station of Jiangxi, Nanchang 330046, China;
3. Agricultural Bureau of Pingxiang, Pingxiang 337000, China
近年来, 由于污水灌溉、污泥农用及含有重金属的农药、化肥、杀虫剂等不合理使用, 造成我国农田土壤重金属污染日益加重, 土壤重金属长期积累不仅破坏土壤生态环境, 阻碍动植物生长, 而且通过食物链危及人体健康[1].在我国土壤重金属污染主要以镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)、铅(Pb)、铬(Cr)、铜(Cu)等污染为主[2].水稻是我国第一大粮食作物, 并且对重金属具有强吸收的特征, 土壤-水稻系统重金属污染问题已成为一个重要的研究领域[3].在重金属污染土壤中种植水稻, 不仅影响了水稻产量, 而且稻米富集后通过食物链进入人体引起健康风险[4].
对于控制重金属向水稻中转移[5]:一方面通过化学固定降低土壤中重金属的活性使其钝化, 例如调控土壤酸碱度(pH)、施用钝化剂或改良剂(如石灰石、沸石粉、磷酸盐类、膨润土、生物炭等)[6, 7]; 另一方面则种植重金属抗性强、低累积型的水稻品种或合理灌溉[8, 9].已有研究表明[10], 不同品种稻米中对于重金属的吸收和积累存在显著差异, 不同的水稻品种或基因类型对重金属的耐性不同, 从而对重金属元素的吸收和积累差异很大, 而且不同基因型水稻品种对重金属的种类也存在明显的差异[11~13].不同品种水稻对Pb、Hg的耐性和富集能力存在显著的基因型差异.合理选育高耐性低积累水稻品种是有效降低稻米重金属污染风险的一个有效途径[13~15].
大多数研究针对不同水稻品种对某一重金属吸收积累的差异, 当前的重金属低累积水稻品种筛选主要关注的是重金属Cd, 而对于其他重金属Hg尤其是As的低累积水稻品种报道较少[10], 而事实上土壤环境中重金属的污染常常是多种重金属的复合污染[16~18], 而对多种重金属复合污染土壤上水稻对重金属积累能力差异研究比较少.关于水稻对重金属的吸收特征研究以室内模拟为主, 但是研究表明水稻在室内模拟和大田试验条件下的生长状况、对重金属元素的吸收、积累和转运具有一定的差异[19, 20].本试验通过研究大田生产条件下不同水稻品种对土壤中重金属(Cd、Pb、Cr、无机As和总Hg)的积累特性的差异, 不仅对于模拟试验是必不可少的验证与补充, 也可以全面了解水稻品种对不同重金属积累特征.
本试验选用市场上已审定推广试验的早中晚主栽水稻品种, 在萍乡重金属污染土壤中进行水稻品种筛选大田试验, 分析同等条件下不同水稻品种对重金属Cd、Pb、Cr、无机As和总Hg吸收积累的差异性, 通过筛选出重金属低吸收或低积累水稻品种, 降低水稻重金属富集含量, 以期为研究水稻品种对重金属的吸收规律和机制提供科学、准确的数据, 并为土壤重金属修复治理提供技术支撑.
1 材料与方法 1.1 供试材料参与筛选的水稻品种共129个, 其中早稻品种35个、中稻品种54个、晚稻品种40个.具体水稻品种目录见表 1~3.供试水稻品种由江西省农业科学院、江西省农技总站、湖南隆平高科、江西天涯种业、江西现代种业等单位或公司提供.
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表 1 不同早稻品种稻米重金属含量的比较/mg·kg-1 Table 1 Comparison of heavy metal content in brown rice of early rice varieties/mg·kg-1 |
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表 2 不同中稻品种稻米重金属含量的比较/mg·kg-1 Table 2 Comparison of heavy metal content in brown rice of different middle rice varieties/mg·kg-1 |
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表 3 不同晚稻品种稻米重金属含量的比较/mg·kg-1 Table 3 Comparison of heavy metal content in brown rice of different late rice varieties/mg·kg-1 |
试验地位于江西省萍乡市湘东区湘东镇某村(113°46′02″E, 27°33′47″N, 160 m).属于亚热带湿润季风气候区, 四季分明, 光照充足, 雨量丰沛, 气候温和, 霜期较短, 年平均气温17.3℃, 平均日照时间为1 500 h左右, 年平均降雨量1 580 mm.试验区土壤为红壤性水稻土, 壤土, 土壤肥力中等, 排灌方便, 属于已受污染的常规耕作大田.对试验田土壤按梅花形5点混合取样进行检测分析其土壤理化性质.试验前耕层土壤pH值5.30, 有机质33.43 g·kg-1, 阳离子交换量20.16 cmol·kg-1, 土壤重金属Cd含量0.86 mg·kg-1, 土壤Pb含量34.00 mg·kg-1、土壤Cr含量61.73 mg·kg-1和土壤As含量14.60 mg·kg-1.
1.2 试验设计试验大田面积为1hm2, 其中早稻和晚稻每个品种小区面积为1.5 m2(1 m×1.5 m), 中稻每个品种小区面积为2.4 m2(1.2 m×2 m).整个试验分早稻、中稻和晚稻这3组分别进行品种筛选试验, 采用随机区组排列, 设3次重复, 每个小区种植50穴, 其中早稻和晚稻株行距为(5株×20 cm)×(10株×16.5 cm), 中稻株行距为(5株×26.5 cm)×(10株×20 cm).试验田四周设保护行, 保护行栽插对应小区品种, 保护行不少于5行.小区间、小区与保护行间留操作走道.供试早稻品种2015年4月6日播种, 采用湿润水育秧, 用农膜保温, 5月3日施基肥, 5月4日同规格移栽, 移栽密度为16.5 cm×20 cm, 7月15日采集稻谷样品, 7月20日收割.供试中稻品种2015年5月21日播种, 采用湿润水育秧, 6月11日施基肥, 6月12日同规格移栽, 移栽密度为20 cm×26.5 cm, 针对中稻生长期分别在9月24日、10月3日和10月17日采集稻谷样品.供试晚稻品种2015年6月16日播种, 采用湿润水育秧, 用农膜保温, 7月8日同规格移栽, 移栽密度为16.5 cm×20 cm, 10月21日采集稻谷样品, 10月28日收割.肥料施用:统一测土配方施肥法施肥, 移栽前整田块时施45%复合肥600 kg·hm-2作基肥, 移栽后7 d施尿素600 kg·hm-2作促蘖肥, 孕穗初期施尿素、氯化钾600 kg·hm-2作穗肥.
1.3 样品采集与分析植株样品采集于水稻收获期, 分别对各小区进行样品的采集, 每个处理小区采5株水稻, 收获的水稻样品各部分分别用去离子水洗净, 晾干后放入烘箱, 于105℃下杀青30 min, 在70℃下烘干至恒重, 稻谷脱壳成糙米并粉碎.样品用湿式消解法消解后, 用石墨炉原子吸收光谱法测定Cd、Pb、Cr; 样品中无机As测定, 用湿式消解法消解后, 用原子荧光光度法测定; 样品中总Hg测定, 用微波消解法消解, 用原子荧光光度法测定.在测定稻米样品的同时, 使用国家标准物质湖南大米GBW10045(GSB-23), 进行质量控制分析, 同时全程进行空白试验.
1.4 数据处理不同品种水稻糙米Cd、Pb、Cr、无机As和总Hg含量数据均为平均值±标准差.应用R 3.4.3(www.r-project.org)进行统计和分析数据, 各处理间差异显著性分析采用R语言vegan程序包中t检验, 通过R语言线性相关分析糙米Cd含量与其对应重金属Pb、Cr、无机As和总Hg含量的相关性, 以上制图通过R语言软件完成.不同水稻品种糙米Cd含量聚类分析由DPS数据处理软件完成并制图.
2 结果与分析 2.1 不同品种稻米重金属含量差异由表 1中不同早稻品种稻米重金属含量的比较可以看出.各品种糙米Cd含量变幅不大, 35个水稻品种糙米Cd含量在0.35~0.60 mg·kg-1之间, 最高值和最低值相差2倍, 均值为0.46 mg·kg-1, 均超过GB/T 5009.15(国家标准要求≤0.2 mg·kg-1), 超标率100%, 吸收量最多的主要为早丰优402、五优301、五优156、荣优463、淦鑫203等.糙米Pb含量在0.08~0.30 mg·kg-1之间, 均值为0.15 mg·kg-1, 其中5个水稻品种超过GB 5009.12(国家标准要求≤0.2 mg·kg-1), 超标率14.29%, 5个糙米Pb含量超标的水稻品种为株两优538、株两优6108、陵两优104、早丰优402和陆两优98. 35个品种糙米Cr含量(GB/T 5009.123, 国家标准要求≤1 mg·kg-1)、无机As含量(GB/T 5009.11, 国家标准要求≤0.2 mg·kg-1)和总Hg含量(GB/T 5009.17, 国家标准要求≤0.02 mg·kg-1)均未超过国家标准, 其中糙米Cr含量在0.02~0.38 mg·kg-1之间, 均值为0.19 mg·kg-1; 糙米无机As含量在0.05~0.17 mg·kg-1之间, 均值为0.11mg·kg-1; 糙米总Hg含量在0.002~0.013 mg·kg-1之间, 均值为0.005 mg·kg-1.
由表 2中不同中稻品种稻米重金属含量的比较可以看出, 各品种糙米Cd含量变幅较大, 54个水稻品种糙米Cd含量在0.03~0.45 mg·kg-1之间, 最高值和最低值相差15倍, 均值为0.19 mg·kg-1, 18个品种糙米镉含量在0.24~0.45 mg·kg-1之间, 超过国家标准, 超标率33.33%; 36个品种糙米镉含量在0.03~0.20 mg·kg-1之间, 符合国家标准, 吸收量最多的主要为Y两优302、Y两优5813、中浙优1号、Y两优1号、珞优8号等. 54个品种糙米Pb含量、Cr含量、无机As含量和总Hg含量均未超过国家标准, 其中糙米Pb含量在0.01~0.19 mg·kg-1之间, 均值为0.07 mg·kg-1; 糙米Cr含量在0.03~0.97 mg·kg-1之间, 均值为0.13 mg·kg-1; 糙米无机As含量在0.03~0.19 mg·kg-1之间, 均值为0.13 mg·kg-1; 糙米总Hg含量在0.001~0.010 mg·kg-1之间, 均值为0.005 mg·kg-1.
由表 3中不同晚稻品种稻米重金属含量的比较可以看出.各品种糙米Cd含量变幅不大, 40个水稻品种糙米Cd含量在0.08~0.20 mg·kg-1之间, 最高值和最低值相差2倍, 均值为0.14 mg·kg-1, 均未超过国家标准.糙米Pb含量在0.10~0.41 mg·kg-1之间, 均值为0.13 mg·kg-1, 其中1个水稻品种超标(0.31 mg·kg-1), 超标率2.5%, 糙米Pb含量超标的水稻品种为吉优335. 40个品种糙米Cr含量、无机As含量和总Hg含量均未超过国家标准, 其中糙米Cr含量在0.04~0.30 mg·kg-1之间, 均值为0.12 mg·kg-1; 糙米无机As含量在0.03~0.09 mg·kg-1之间, 均值为0.05 mg·kg-1; 糙米总Hg含量在0.002~0.004 mg·kg-1之间, 均值为0.003 mg·kg-1.
2.2 不同水稻品种糙米Cd含量聚类分析对供试水稻糙米重金属Cd含量进行聚类分析, 结果见图 1.早稻糙米Cd含量聚类分析可分为3类[图 1(a)]:第Ⅰ类各1个品种(优Ⅰ2009)、第Ⅱ类各1个品种(早丰优402)和第Ⅲ类其他33个品种.中稻糙米Cd含量聚类分析可分为3类[图 1(b)]:第Ⅰ类各4个品种(Y两优302、广两优香66、甬优9号和外引7号)、第Ⅱ类各1个品种(甬优12号)和第Ⅲ类其他49个品种.晚稻糙米Cd含量聚类分析可分为3类[图 1(c)]:第Ⅰ类各2个品种(湘丰优100和优航1573)、第Ⅱ类各2个品种(丰两优一号和五丰优淦3号)和第Ⅲ类其他38个品种.其中第Ⅰ类和第Ⅱ类糙米重金属Cd含量最高, 因此, 在重金属污染区进行品种选择时可以优先考虑第Ⅲ类.
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图 1 不同水稻品种糙米Cd含量聚类分析 Fig. 1 Clustering analysis of the Cd content of brown rice in different rice varieties |
为了进一步分析水稻品种对重金属吸收的差异, 通过选择不同种植时期不同水稻类型比较了两系杂交稻与三系杂交稻重金属积累差异.从图 2可以看出, 早、中、晚稻都表现出三系杂交稻Cd含量略高于两系杂交稻, 但是两系杂交稻与三系杂交稻间糙米Cd含量无明显差异[P>0.05, 图 2(a)].早稻两系杂交稻与三系杂交稻间糙米Cr、总Hg含量有显著差异(P<0.01), 具体表现为三系杂交稻糙米Cr、总Hg含量极显著高于两系杂交稻[图 2(c)和图 2(e)].两系杂交稻与三系杂交稻间糙米Pb含量和无机As含量无明显差异[P>0.05, 图 2(b)和图 2(d)].
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**与n.s.表示相同种植时期水稻的杂交稻品种显著差异, 其中**表示P < 0.01, n.s.表示P>0.05 图 2 二系和三系杂交稻糙米重金属含量的差异 Fig. 2 Differences in heavy metal content in brown rice between two-line hybrid rice and three-line hybrid rice |
进一步了解糙米重金属之间吸收机制, 分析了早、中、晚稻糙米中Cd含量与糙米Pb、Cr、无机As和总Hg含量相互间的关系, 中稻糙米Cd含量与Pb含量间呈显著正相关(r=0.44, P=0.02);中稻糙米Cd含量与总Hg含量间呈极显著正相关(r=0.34, P=0.001);中稻糙米Cd含量与无机As含量间存在极显著负相关(r=0.43, P=0.001);中稻糙米Cd含量与Cr含量间相关性较差(r=0.28, P=0.65).
3 讨论 3.1 不同品种稻米重金属含量差异品种差异是影响水稻对重金属元素吸收的主要因素.本研究中糙米重金属污染影响最大的是Cd, 其次是Pb, 而Cr、无机As和总Hg影响较小.本试验中35个早稻品种糙米Cd含量在0.35~0.60 mg·kg-1之间, 均值为0.46mg·kg-1, 超标率100%;糙米Pb含量在0.08~0.30 mg·kg-1之间, 超标率14.29%;糙米Cr、无机As和总Hg含量均未超过国家标准. 54个中稻品种糙米Cd含量在0.03~0.45 mg·kg-1之间, 均值为0.19 mg·kg-1, 超标率33.33%;糙米Pb、Cr、无机As和总Hg含量均未超过国家标准. 40个晚稻品种糙米Cd含量在0.08~0.20 mg·kg-1之间, 均值为0.14mg·kg-1, 均未超过国家标准; 糙米Pb含量在0.10~0.41 mg·kg-1之间, 超标率2.5%;糙米Cr、无机As和总Hg含量均未超过国家标准.已有研究表明水稻对镉的积累和耐性具有明显的品种间差异[21~23].水稻品种不同, 造成作物形态结构和生理特性产生差异, 导致水稻对重金属元素的吸收和分配存在很大差异[24, 25].温娜[26]的研究表明在轻微度和轻度污染区(土壤有效镉含量在0.3~0.9 mg·kg-1之间), 株两优819和中嘉早17属于稻米中Cd积累量较低且遗传稳定性好的基因型, 而在本试验中株两优819和中嘉早17的稻谷Cd含量超标, 可能是由于不同筛选试验研究的条件不统一, 即环境因素不同而引起的, 特别是本试验选用的土壤Cd含量较高需要进一步试验和探讨, 各水稻品种对镉吸收和累积受地力条件、农艺操作等环境因素影响大, 可能要远远大于基因型效应.
3.2 不同类型水稻糙米重金属积累特性早、中、晚稻都表现出三系杂交稻Cd含量高于两系杂交稻, 但是差异不明显, 早稻三系杂交稻糙米Cr、总Hg含量显著高于两系杂交稻, 两系杂交稻与三系杂交稻间糙米Pb和无机As含量没有明显差异.殷敬峰等[17]的研究发现, 三系杂交稻的糙米Cd、Cu含量极显著高于两系杂交稻, 曾翔等[27]的研究结果也表明糙米对Cd的积累能力表现为三系杂交晚稻>两系杂交晚稻.本试验中表现出三系杂交稻Cd含量略高于两系杂交稻, 但是没有达到显著差异, 可能由于样本量大小和水稻品种的影响.李波等[8]的研究发现对Hg的吸收积累顺序是:籼型常规稻>三系杂交稻>两系杂交稻.仲维功等[28]的研究同时发现, 不同类型水稻品种对于As的累积不存在显著差异性, 这一点与本研究水稻品种对于As的累积没有明显差异结果相一致.不同水稻品种由于遗传上的差异, 对稻田中重金属的吸收存在很大差异, 水稻对重金属的吸收积累, 受品种类型和遗传背景的影响较大.
3.3 糙米Cd与重金属Pb、Cr、无机As和总Hg间的相互关系中稻糙米Cd含量与Pb和总Hg含量间呈显著正相关; 与无机As含量间存在极显著负相关; 而与Cr含量间相关性较差.这表明, 本试验过程中中稻对Cd、Pb和Cd、总Hg的吸收积累表现出协同吸收, 对Cd、无机As的吸收积累表现出拮抗作用, 而对Cd、Cr的积累相互间关系不明显.周启星等[29]和徐加宽等[30]的研究发现, 土壤中不同重金属元素组合和器官、不同供试品种、浓度、以及在不同供试条件下, 重金属间的相互作用具有不同的表现形式(协同作用或拮抗作用).研究发现不同基因类型水稻品种吸收重金属时重金属元素间的排斥作用不同[31].关于水稻糙米吸收积累重金属的过程以及重金属元素间的相互作用还要进一步研究和证实.
以上研究表明, 水稻各品种间和类型对重金属(以重金属Cd为主)的吸收和累积存在差异, 早、中、晚稻品种筛选试验数据差异很大, 不仅受到季节差异、降水、气温影响, 而且还与试验田土壤、农艺操作等因素有关.综上, 水稻对重金属特别是镉的吸收和累积是个复杂的过程, 而本试验是基于萍乡地区一年周期大田试验, 受各种环境因素影响大, 因此还需要通过更多因素的比较试验, 同时应增加盆栽试验, 为筛选出镉低积累型水稻品种提供更准确、全面的数据.
4 结论(1) 35个早稻品种糙米Cd含量在0.35~0.60 mg·kg-1之间, 均值为0.46 mg·kg-1, 超标率100%, 糙米Pb含量在0.08~0.30 mg·kg-1之间, 超标率14.29%; 54个中稻品种糙米Cd含量在0.03~0.45 mg·kg-1之间, 均值为0.19 mg·kg-1, 超标率33.33%; 40个晚稻品种糙米Cd含量在0.08~0.20 mg·kg-1之间, 均值为0.14 mg·kg-1, 均未超过国家标准.
(2) 根据糙米Cd含量进行聚类分析, 将早、中、晚稻划为3类, 其中第Ⅰ类和第Ⅱ类糙米重金属Cd含量最高, 在重金属污染区进行品种选择时可以优先考虑第Ⅲ类.
(3) 早、中、晚稻都表现出三系杂交稻Cd含量明显高于两系杂交稻, 早稻三系杂交稻糙米Cr、总Hg含量显著高于两系杂交稻, 而两系杂交稻与三系杂交稻间糙米Pb和无机As含量差异不明显.
(4) 中稻糙米Cd含量与Pb和总Hg含量间呈显著正相关; 与无机As含量间存在极显著负相关; 而与Cr含量间相关性较差.
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